修饰蛋白定量分析 • 奥斯卡DIA泛酰化蛋白质组
· 产品定义
在代谢重编程(Metabolic Reprogramming)过程涉及的调控网络中,短链脂肪酰化修饰(以下简称为酰化修饰-Acylation)是一个重点的研究方向。酰化修饰有多种类型,除了最经典的乙酰化,后来陆续发现琥珀酰化、巴豆酰化、乳酰化等等。不同酰化之间既有共性,也有个性:
因此,要深入理解代谢重编程的全貌,就有必要对将多种酰化修饰看做整体,进行联合研究和分析。
中科新生命特别发布奥斯卡DIA泛酰化修饰组,突破传统多种酰化修饰研究中存在的样本要求高、生物信息失真、检测成本门槛高等瓶颈,实现一次性对一份样本中的乙酰化、琥珀酰化、乳酰化修饰的高深度检测,助力研究者从更全面的角度解析代谢重编程的酰化修饰改变,并深入分析修饰间的crosstalk关系。
为什么要聚焦乙酰化、琥珀酰化、乳酰化修饰研究?
1. 三种修饰分别代表不同的能量代谢状态:乙酰化广泛参与糖酵解、脂肪酸氧化及三羧酸循环等能量代谢途径的调控;琥珀酰化深度参与细胞有氧三羧酸循环;乳酰化深度参与细胞无氧糖酵解;从而构成细胞从有氧到无氧代谢转换的"分子开关"网络。
2. 三种修饰引起不同的理化性质改变,带来更多方向的功能研究:乙酰化修饰可增加蛋白质的疏水性;琥珀酰化会翻转赖氨酸(K)的电荷状态,增加蛋白质局部亲水性;乳酰化中和赖氨酸(K)的电荷且乳酰基团中的羟基(-OH)可作为氢键供体/受体形成额外氢键,改变蛋白质二级/三级结构的稳定性。
图1 主要酰化修饰的代谢来源及理化性质的差异
· 技术路线
修饰肽段使用多重泛单抗 (单克隆数>20)进行富集,富集后的肽段使用Astral高端质谱仪进行DIA模式的检测。由于发生乙酰化、琥珀酰化、乳酰化修饰的赖氨酸,分子质量分别会增加42.01Da(乙酰化修饰)、100.0186 Da(琥珀酰化修饰)、72.021Da(乳酰化修饰),数据库搜索时,根据分子质量偏移,锁定乙酰化、琥珀酰化、乳酰化修饰肽段及位点。
· 技术优势
1. 突破传统方法局限,实现一次性对多种酰化修饰的深度检测
2. 修饰专用的色谱体系+Astral DIA检测模式,实现泛酰化修饰的高深度检测
3. 深耕修饰领域,厚积项目成果
· 推荐组合产品
1. 奥斯卡DIA泛酰化蛋白质组+奥斯卡DIA蛋白质组
2. 奥斯卡DIA泛酰化蛋白质组+能量代谢靶向检测
· 推荐应用领域
1. 肿瘤代谢重编程与恶性进展研究
2. 代谢性疾病
3. 神经性疾病
4. 心血管疾病
5. 肝脏&肾脏疾病
· 送样建议
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样品类型 |
推荐送样量 |
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动物组织 |
动物心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺等 |
≥ 100 mg/样 |
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植物组织 |
植物根、茎、叶、果实等 |
≥ 1g/样 (根和果实适当多送一点) |
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细胞 |
细胞沉淀 |
≥ 5×10^7个细胞 |
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真菌 |
菌体 |
≥ 1.5 g |
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细菌 |
菌体 |
≥ 200 mg |
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... |
蛋白量 |
≥ 4 mg |
